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E-NTPDasas: Enzimas que regulan la concentración extracelular de ATP, ADP y adenosina en la retina de vertebrados
Lionel David Alfie.
Tesis de Licenciatura. UNIV.DE BUENOS AIRES / FAC.DE CS.EXACTAS Y NATURALES.
  ARK: https://n2t.net/ark:/13683/pux8/Sou
Resumen
Las ectonucleósido trifosfato difosfohidrolasas (E-NTPDasas) son una familia de enzimas integrales de membrana que hidrolizan nucleósidos di y trifosfato extracelulares. Particularmente, en el sistema nervioso central, las E-NTPDasas se han propuesto como enzimas capaces de controlar la comunicación intercelular mediada por nucleótidos. Aunque existen diversos reportes que describen roles importantes para los nucleótidos extracelulares y las E-NTPDasas en el ojo, hasta el momento no se ha identificado la localización de estas enzimas en la retina de vertebrado. En este trabajo se realizó una detallada caracterización, por inmunohistoquímica e inmunofluorescencia y estudios de colocalización con marcadores retinianos específicos, de dos miembros principales de la familia de E-NTPDasas con actividad extracelular en la retina neural de dos especies de vertebrado filogenéticamente distantes, como el ratón y el pez cebra. Asimismo, se demostró que homogenatos retinianos de ambas especies exhiben actividad ecto-ATPásica que puede atribuirse al menos a los dos subtipos de enzimas estudiados, las E-NTPDasas 1 y 2, cuya expresión fue descrita en este trabajo de tesis de licenciatura. En la retina de ratón, la E-NTPDasa 2 está principalmente distribuida en la membrana de las células de Müller, atravesando todas las capas retinianas, indicando que por ejemplo el ADP podría acumularse en el microambiente que rodea a estas células gliales. Esta enzima, también, se expresa en las dendritas de las células ganglionares en la capa de sinapsis interna. La E-NTPDasa 1, en cambio, se encuentra regionalizada principalmente en neuronas, ya que se encontró expresión de esta enzima en prolongaciones de células horizontales y ganglionares en ambas capas sinápticas, externa e interna, de la retina de este mamífero. Este hallazgo sugiere que nucleótidos tales como ATP, ADP y UTP pueden ser hidrolizados en la superficie de los procesos sinápticos de estos tipos neuronales. Asimismo, la E-NTPDasa 1 en el roedor se detectó en vasos intrarretinianos. En el pez cebra, las ENTPDasas 1 y 2 parecen localizarse sobre prolongaciones de las células horizontales en la capa sináptica externa, aunque estarían regionalizadas de manera diferencial sobre la membrana de las mismas. También se detectó su expresión en segmentos de membrana de los fotorreceptores y en las dendritas y axones de las células ganglionares, sin embargo, ninguno de estos subtipos enzimáticos sería expresado por las células de Müller. Además, ambos subtipos de E-NTPDasas se expresarían en las membranas de células recientemente postmitóticas o aún mitóticamente activas presentes en el borde proliferativo germinal en la periferia de la retina de pez cebra. La interpretación de estos resultados posee un correlato funcional en la retina de ambos modelos de vertebrado, ya que la presencia de la E-NTPDasa 1 favorece, por un lado, la terminación de la señal por ATP y ADP y, por el otro, la producción de adenosina, mientras que la de tipo 2 resulta en la acumulación de ADP, estimulando diferentes vías de señalización purinérgica.Los resultados presentados en este estudio sugieren una regulación compartimentalizada de la disponibilidad de nucleótidos extracelulares en el entorno de sus receptores específicos en las distintas capas retinianas, evidenciando un rol relevante para la señalización mediada por nucleótidos extracelulares en la retina de vertebrados.
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